貨號(hào) YJ00007: 外泌體熒光標(biāo)記
一、服務(wù)簡(jiǎn)介：
雙層囊膜結(jié)構(gòu)（茶托狀）是外泌體重要標(biāo)志之一，但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可達(dá)0.1 - 0.2 nm，可將被觀察物體放大至數(shù)百萬(wàn)倍，是外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測(cè)的經(jīng)典方法。
二、服務(wù)平臺(tái)儀器：
儀器名稱 | 品牌貨號(hào) | 特征 | 功能作用 |
超高速離心機(jī) | 貝克曼Optima XPN | 最大離心力802000g | 超高速離心提取 |
納米粒子分析儀 | 馬爾文NS300 | 粒徑檢測(cè)范圍10-2000nm | 粒徑分布和濃度 |
透射電鏡儀 | 賽默飛Tecnai G2 | 觀察微結(jié)構(gòu) | 拍攝外泌體形態(tài) |
熒光顯微鏡 | 奧林巴斯 | 熒光和白光 | 外泌體細(xì)胞示蹤 |
細(xì)胞培養(yǎng)箱 | 賽默飛 3111 | CO2培養(yǎng)箱 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
腦立體定位注射儀 | 眾實(shí) | 腦立體定位注射外泌體 | 定位注射外泌體 |
小動(dòng)物活體成像儀 | Cliper IVIS lumina II | 波長(zhǎng)范圍：400-900nm | 外泌體活體示蹤 |
動(dòng)物房 | 國(guó)產(chǎn)品牌 | SPF級(jí)別 | 動(dòng)物飼養(yǎng) |
astral-DIA分析儀器 | Orbitrap Astral | 二級(jí)碎片離子定量 | 鑒定外泌體蛋白 |
三、服務(wù)流程：
1. 固定：外泌體用電鏡級(jí)2.5% 終濃度的戊二醛固定過(guò)夜。
2. 載網(wǎng)處理：放電儀處理載網(wǎng)。
3. 樣本固定到載網(wǎng)上：加5ul樣本至載網(wǎng)上。
4. 染色：磷鎢酸染色。
5. 透射電鏡上機(jī)檢測(cè)。
6. 提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
四、樣本要求：
客戶提供：外泌體（30 μl）或由我司分離得到外泌體。
公司提供：基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)周期：10個(gè)工作日。
五、注意事項(xiàng)
1. 外泌體提取后需盡快用戊二醛固定，保持樣本的新鮮。如果沒(méi)有條件及時(shí)固定建議放到-80度保存，避免反復(fù)凍融。
2. 外泌體的濃度需要盡量的大（一般高于1ug/ul或者粒子濃度大于10^10個(gè)/ml），便于拍到典型的外泌體視野。
