Exosome isolation kit Plus (forCell Culture Media)
細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體抽提試劑盒
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產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體抽提試劑盒 | YJ04001 | 50ml |
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運輸和保存方法：室溫
一、產(chǎn)品簡介：
外泌體（Exosomes）是一種直徑在30-200 nm的微小囊泡，可由機(jī)體眾多類型細(xì)胞釋放，并廣泛分布于唾液、血漿、乳汁、尿液等體液當(dāng)中。Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速離心、試劑盒提取等方法。其中超速離心分離得到外泌體，純度高，可滿足于后續(xù)不同實驗的需求，但是儀器要求高，周期長，工作量大。
本試劑盒可以快速從細(xì)胞培養(yǎng)上清中獲得大量完整的外泌體顆粒，普通的實驗室離心機(jī)就可以完成，提取的外泌體適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡、分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測序等應(yīng)用。
二、操作方法：
樣品預(yù)處理：
1、收集新鮮的樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可水浴中解凍，待完全融化后置于冰上待用。
2、細(xì)胞培養(yǎng)上清樣品轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃，3000×g 離心10 min，棄沉淀，并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離：
1、使用前請將外泌體抽提試劑充分混勻。
2、向樣品中加入1/4 倍樣本體積的外泌體抽提試劑，渦旋振蕩1 min，放置于4℃冰箱靜置2-3 h。
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 提取試劑 |
10ml | 2.5ml |
40ml | 10ml |
3、取出裝有混合液的離心管，4℃，10,000×g離心60 min，棄上清，收集富含外泌體的沉淀。
4、用100-200ul的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物，使其充分懸浮于PBS后，將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃，12,000×g離心2 min，棄沉淀，保留上清液，該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
6、純化后的外泌體可于4℃保存3天，-80℃ 長期保存，建議對外泌體進(jìn)行分裝后保存，避免反復(fù)凍融。
