Exosome isolation kit Plus (forSerum/Plasma)
外泌體提取試劑盒（血清/血漿）
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
外泌體抽提試劑盒（血清/血漿） | YJ04002 | 50ml |
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運(yùn)輸和保存方法：室溫
一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
外泌體（Exosomes）是一種直徑在30-200 nm的微小囊泡，可由機(jī)體眾多類(lèi)型細(xì)胞釋放，并廣泛分布于唾液、血漿、乳汁、尿液等體液當(dāng)中。Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速離心、試劑盒提取等方法。其中超速離心分離得到外泌體，純度高，可滿足于后續(xù)不同實(shí)驗(yàn)的需求，但是儀器要求高，周期長(zhǎng)，工作量大。
本試劑盒可以快速?gòu)难?血漿中獲得大量完整的外泌體顆粒，普通的實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)就可以完成，提取的外泌體適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡、分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測(cè)序等應(yīng)用。
二、操作方法：
樣品預(yù)處理：
1、收集新鮮的樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可水浴中解凍，待完全融化后置于冰上待用。
2、血清/血漿樣品轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃，3000×g 離心10 min，棄沉淀，并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
3、將轉(zhuǎn)移的上清，4℃，10,000×g 離心20 min，棄沉淀，將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離：
1、向預(yù)處理后的樣品中，加入4 倍體積的1×PBS 充分混勻。
血清/血漿+PBS | 提取試劑 |
200ul+800ul | 200ul |
1ml+4ml | 1ml |
5ml+20ml | 5ml |
2、在PBS稀釋后的樣品中，繼續(xù)加入相應(yīng)量的提取試劑；蓋緊離心管蓋，渦旋振蕩1-2 min，放置于4℃冰箱靜置2-3 h。
3、取出裝有混合液的離心管，4℃，10,000×g離心60 min，棄上清，收集富含外泌體的沉淀。
4、用1/5體積的樣本體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物，使其充分懸浮于PBS后，將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃，12,000×g離心2 min，棄沉淀，保留上清液，該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
6、純化后的外泌體可于4℃保存3天，-80℃ 長(zhǎng)期保存，建議對(duì)外泌體進(jìn)行分裝后保存，避免反復(fù)凍融。
