細(xì)胞培養(yǎng)基需要更換的四個指標(biāo)

　　無論是原代細(xì)胞培養(yǎng)還是細(xì)胞系的傳代培養(yǎng)，一旦培養(yǎng)開始，就要定期更換培養(yǎng)基或“飼養(yǎng)”，如果細(xì)胞增殖。隨后遲早要進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對干不增殖的培養(yǎng)物，也需要定期更換培養(yǎng)基，因?yàn)?a astyle_h="1" _t="103" _i="AGcI/////w8SF2h0dHA6Ly93d3cuc2hpY2VsbC5jb20vGAA=" _n="http://www.shicell.com/" target="_blank" textvalue="細(xì)胞">細(xì)胞仍會代謝，培養(yǎng)基的某些成分會耗盡或自然降解細(xì)胞傳代間隔在不同細(xì)胞系中因生長速率和新陳代謝的不同而不同。有四個指標(biāo)表示需要更換培養(yǎng)基:

　　1.pH降低，要考慮pH降低的速率和確切值。當(dāng)pH從7.0降至6.5，大多數(shù)細(xì)胞停止生長;在pH6.5和6.0之間，細(xì)胞開始失去活性。如果培養(yǎng)基從紅色變成橙色，再變成黃色，那么需要更換培養(yǎng)基。盡量估計pH降低的速率;如果pH為7.0的培養(yǎng)物每天降低0.1pH單位，那么在換液前多放置一兩天沒什么傷害，但若培養(yǎng)物每天降低0.4pH單位，則需在24～48h 內(nèi)換液，不可不換液而放置過周末。

　　2.細(xì)胞濃度，細(xì)胞以高濃度培養(yǎng)比以低濃度培養(yǎng)更快地消耗培養(yǎng)基。pH變化速率能夠證明這一點(diǎn)，但也不總是如此。

　　3.細(xì)胞類型，正常細(xì)胞(例如二倍體成纖維細(xì)胞)通常在高密度時停止分裂，這一現(xiàn)象是由于細(xì)胞擁擠，生長因子耗盡及其他一些因素造成的。細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的G1期，即使放置2～3周甚至更長時間，細(xì)胞也很少變性。然而，轉(zhuǎn)化細(xì)胞、連續(xù)細(xì)胞系以及一些胚胎細(xì)胞在細(xì)胞密度過高時迅速變性，除非每天換液或傳代。

　　4.形態(tài)衰退，這點(diǎn)需通過定期觀察和熟悉細(xì)胞系來預(yù)計。如果任其退化發(fā)展下去，它將成為不可逆的，細(xì)胞將會進(jìn)入凋亡。