細(xì)胞凍存的10大理由以及凍存條件

　　由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇，有限細(xì)胞系的衰老以及連續(xù)細(xì)胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性，使細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)時有變異傾向。此外，即使在管理好的實驗室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發(fā)生率也很高。因此，存在諸多理由進行冷凍儲存細(xì)胞，總體概述有10大不得不凍存細(xì)胞的理由：

　　(1)由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移;

　　(2)衰老，導(dǎo)致細(xì)胞系消失;

　　(3)生長特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得;

　　(4)由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性;

　　(5)微生物污染;

　　(6)其他細(xì)胞系的交叉污染;

　　(7)由于操作粗心而導(dǎo)致的錯誤鑒別;

　　(8)孵育箱故障;

　　(9)對于保存那些不立即使用的細(xì)胞系，可節(jié)省時間和材料;

　　(10)需要將細(xì)胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

　　在考慮凍存細(xì)胞之前，需滿足以下特定條件：

　　1.確認(rèn)凍存前需證實細(xì)胞系未受污染，且確為該細(xì)胞系。盡管對于新獲得的細(xì)胞系，可以在完全確認(rèn)前凍存幾支，但在大量凍存前應(yīng)進行徹底確認(rèn)。

　　2.凍存時間，如果是有限細(xì)胞系，這些細(xì)胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長，獲得足夠量的細(xì)胞再進行凍存。連續(xù)細(xì)胞系應(yīng)將其克隆化，選擇特征性的克隆，待生長至足夠數(shù)量再進行凍存。連續(xù)細(xì)胞系有其優(yōu)勢：它們可無限生長，生長比較迅速，容易克隆，但是它們?nèi)狈z傳穩(wěn)定性。有限細(xì)胞系通?；蚪咏扼w。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的，但是，它們很難克隆，生長緩慢，死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。