詳細介紹下植物細胞的培養(yǎng)方法

　　目前，植物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)還存在長期培養(yǎng)、易受污染、細胞數(shù)量增多凝集形成大團塊、制造成本高等諸多問題。今后，隨著反應器結(jié)構(gòu)和工藝的進一步優(yōu)化，這些問題應當會得以解決，細胞大規(guī)模培養(yǎng)也將會發(fā)揮它更大的作用。

　?、僦苽渲参飭渭毎姆椒ㄍǔ０C械法、酶法和愈傷組織誘導法。

　　機械法主要是通過機械研磨獲得游離的單細胞。這種方法得到的細胞數(shù)量少，效率低，所以目前一般不采用這種方法生產(chǎn)。

　　酶法是目前獲得單細胞有效、常用的方法。由于植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此可以利用某些水解酶如纖維素酶和果膠酶解離葉片，釋放游離的單細胞。

　　愈傷組織是指一組不規(guī)則、同質(zhì)的細胞群，它們是母體植物的一部分，已接種到特定培養(yǎng)基中并從傷口培養(yǎng)一段時間。由于愈傷組織內(nèi)細胞之間的連接相對松散，因此也可以通過愈傷組織的液體懸浮和搖動培養(yǎng)獲得單個細胞。

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　　用于植物單細胞培養(yǎng)的方法包括護理培養(yǎng)、微室培養(yǎng)和平板培養(yǎng)。護理培養(yǎng)是一種利用活躍生長的愈傷組織來監(jiān)測和保護單個細胞，使其能夠生長和增殖的方法。具體方法是將愈傷組織注入裝有培養(yǎng)基(培養(yǎng)基主要成分為無機鹽、氨基酸、維生素、糖類、植物生長調(diào)節(jié)劑、蒸餾水、瓊脂等，pH 5.8)的無菌三角中。將無菌濾紙放入瓶中，濾紙上接種單細胞，密封后置于恒溫培養(yǎng)箱中，25℃±2℃培養(yǎng)。這種方式培養(yǎng)的細胞容易存活，但不便于顯微鏡觀察。