簡單介紹下原代細胞的培養(yǎng)條件

　　原代細胞非常接近并能反映體內(nèi)生長特性，適用于藥敏試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞培養(yǎng)物，也稱為原代培養(yǎng)物，是從供體體外獲得的組織細胞的一種培養(yǎng)物。這是建立細胞系的一個步驟和基本技術。下面介紹下原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要徹底沖洗干凈，盡可能消除消化液的毒性。

　　2、細胞接種濃度要稍高，至少5×108個細胞/L。

　　3. 培養(yǎng)基可在Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)中培養(yǎng)。

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%;

　　必須在含 5.5% CO2 的 37°C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　6、前兩天減少震動，防止剛貼壁的細胞脫落漂浮。

　　7、如果電芯基本貼壁生長并逐漸形成網(wǎng)絡，則需要更換原電池。

　　8. 使用骨髓或外周血中的漂浮細胞培養(yǎng)1周時，細胞懸液在更換培養(yǎng)基前應低速離心。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

　　2、短期培養(yǎng)可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行。

　　3. 可在5至8 x 109 / L的細胞濃度范圍內(nèi)進行瓶試驗。

　　4、長期培養(yǎng)時，應在淋巴細胞中加入生長因子，在白血病細胞中加入少量原患者血清，以促進細胞增殖。

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。